植物生理学是一门研究植物生命活动规律、揭示植物生命现象本质的一门科学。接下来，小编为了帮助备考2022考研414植物生理生化的考研儿们，学好专业课知识，特意分享——2022考研414植物生理生化知识:蛋白质的分离与纯化，供考生参考。
2022考研414植物生理生化知识:蛋白质的分离与纯化
1.蛋白质的抽提原理及方法
分离纯化的一般程序可分为：前处理、粗分级和细分级分离三个步骤。
A前处理步骤：将欲分离纯化的目的蛋白质从细胞中溶解出来。胞外蛋白质可以直接用缓冲液提取，胞内蛋白质的提取涉及破碎细胞等步骤，再通过离心除去大的细胞碎片等。
B粗分级：这个阶段主要是除去大量的杂质和杂蛋白。一般采用的方法有中性盐或有机溶剂的分级沉淀的方法，以及超过滤等浓缩的方法。
C细分级：对目的蛋白质进一步的提纯。通常采用各种柱层析的方法，如：离子交换层析、凝胶过滤层析、吸附层析、疏水相互作用层析、反相层析等，还可以采用制备性电泳的方法。这一阶段常常同时进行生物活性的检测和纯度的鉴定。
2.蛋白质分离与纯化的主要方法
电泳、层析和离心蛋白质等大分子具有两性解离性质，在溶液中也会带上不同的电荷，置于电场中也会发生电泳现象，因此可以通过电泳对蛋白质进行分离。
层析技术主要有凝胶过滤柱层析、离子交换柱层析及亲和层析。
离心法分离蛋白质等大分子是基于它们的密度差异。当颗粒的密度大于溶液密度时，颗粒就会在溶液中下沉。
基础生化的实验中，重点掌握 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、凝胶过滤柱层析(分子筛柱层析)的原理及基本操纵步骤。
3.蛋白质的定量方法
凯氏定氮法、紫外吸收法、Folin-酚法及考马斯亮蓝法。
以上是“2022考研414植物生理生化知识:蛋白质的分离与纯化”，希望对复习备考农学植物的考生们有所帮助!祝2022考研考生们，通过自己的努力，一站成研!
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