统考农学专业中,有选择415动物生理生化专业的考生们,该专业课满分为150分。接下来,小编为帮助这类考生,梳理动物生理生化专业知识,精心分享——2021考研415动物生理生化简答题:什么是盐析、盐溶?有何用途?供考生参考。
2021考研415动物生理生化:什么是盐析、盐溶?有何用途?
什么是盐析、盐溶?有何用途?与KCI、NaCl等相比,(NH4)₂SO4用作沉淀剂的优点是什么?
参考答案:
盐析(salting out)是通过向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐(如硫酸铵),致使蛋白质发生沉淀的蛋白质分离技术。盐析作用主要是由于大量中性盐的加入使水的活度降低,不仅原来溶液中的大部分水转变为盐离子的水化水,而且蛋白质分子表面通过静电作用结合的水化层也被移去以溶剂化盐离子,使蛋白质分子表面的疏水残基充分暴露,从而发生聚集而沉淀下来。不同蛋白质分子表面疏水基团含量不同,溶解度不同,被沉淀下来所需的中性盐浓度也就不同。因此,选定某浓度中性盐,可以将目标蛋白沉淀分离。此法是按溶解度分离蛋白质的一种方法,常用于蛋白质粗分级分离,也可用于蛋白质浓缩。
中性盐影响蛋白质溶解度的能力是其离子强度的函数。与KCl、NaCl 等相比,(NH4)₂SO4用作沉淀剂的优点是:因为它是二价离子中性盐,而且在水中溶解度很高,溶解度的温度系数也较低,故能在低温下(4°C)以高浓度存在,争夺溶液中的水以及蛋白质分子表面的水化水,使蛋白质溶解度有效降低,从而使蛋白质在保持活性的情况下从溶液中沉淀出来。
低浓度中性盐增加蛋白质溶解度的现象称为盐溶(salting in)。盐溶作用主要是由于蛋白质分子吸附某种盐类离子后形成带电层,使蛋白质分子彼此排斥,同时蛋白质分子与水分子间的相互作用加强,从而增加了蛋白质的溶解度。盐溶常在生物样品蛋白质提取或固体蛋白质溶解时运用。
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