统考农学专业中,有选择415动物生理生化专业的考生们,该专业课满分为150分。接下来,小编为帮助这类考生,梳理动物生理生化专业知识,精心分享——2021考研415动物生理生化题:膜蛋白流动性证明,供考生参考。
2021考研415动物生理生化题:膜蛋白流动性证明
膜蛋白流动性证明
较典型的证据来自1970年Frye和Edidin的细胞融合实验。由于大多本科生尚未做过这类实验,常出现描述错误。如“进行放射性标记后进行光学显微观察”。殊不知放射性标记是不能用光学显微镜直接观察的。有的虽然提到用抗体标记,但没有明确“针对不同细胞膜特异抗原的带有不同荧光基团的抗体”。
现简述如下:
以人细胞和鼠细胞为材料,用带有不同荧光基团的抗体对两种细胞表面的特异抗原蛋白进行免疫荧光标记;然后在合适条件下将两种经过标记的细胞进行融合。在细胞融合初期,可看到杂合细胞的两半分别呈现不同颜色荧光;当保温一定时间以后,两种颜色的荧光点均匀分布于杂合细胞的表面。证明两种细胞的膜蛋白在脂双层中进行了自由侧向运动。
还有一种常用方法可证明膜蛋白的流动性。就是先将活细胞膜上的某种蛋白进行荧光标记,荧光显微镜下可见整个细胞呈现均匀荧光;然后再用激光对细胞某一点进行连续照射,使发生光漂白。此时,可见照射点的荧光被淬灭,显示为无荧光区。之后将细胞在合适温度下放置一定时间再观察。如果整个细胞表面又呈现均匀分布的荧光,则可证明生物膜上的蛋白质发生了流动。
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